DNA 分子的熔解温度 (TM) 是指在特定条件下，双螺旋 DNA 50% 解链为单链 DNA 的温度。TM 值受多种因素影响，其中最关键的是： 核苷酸组成 离子强度 DNA 浓度

本文将详细探讨这些因素对 DNA 分子 TM 值的影响。

核苷酸组成

碱基对 GC 含量

DNA 分子由四种不同类型的核苷酸组成：腺嘌呤 (A)、鸟嘌呤 (G)、胞嘧啶 (C) 和胸腺嘧啶 (T)。其中，G-C 碱基对通过三个氢键形成，而 A-T 碱基对仅通过两个氢键形成。GC 含量越高的 DNA，其 TM 值就越高。

碱基堆叠

碱基堆叠是指相邻碱基之间的疏水相互作用。G-C 碱基对比 A-T 碱基对具有更强的碱基堆叠相互作用，因为它们含有更多的芳香环。GC 含量越高的 DNA，其 TM 值就越高。

离子强度

离子强度是指溶液中带电离子的浓度。较高的离子强度可以屏蔽 DNA 分子带负电荷的磷酸骨架之间的排斥力，从而促进双螺旋结构的稳定性。离子强度越高，TM 值就越高。

阳离子效应

单价阳离子（如 Na+）可以中和 DNA 分子磷酸骨架上的负电荷，从而稳定双螺旋结构。双价阳离子（如 Mg2+）可以桥接相邻磷酸骨架，痛风饮食疗法从而诱导 DNA 解链。单价阳离子有助于提高 TM 值，而双价阳离子则会降低 TM 值。

DNA 浓度

DNA 浓度会影响 TM 值，但这种影响相对较小。高浓度的 DNA 可以促进双螺旋体的形成，从而提高 TM 值。极高的 DNA 浓度可能会导致非特异性聚集，从而降低 TM 值。

其他因素

除了上述主要因素外，还有其他一些因素也会影响 DNA 分子 TM 值，包括： DNA 长度：较长的 DNA 分子具有更高的 TM 值。 DNA 甲基化：甲基化的 DNA 分子具有更高的 TM 值。 杂合序列：含有杂合序列的 DNA 分子具有较低的 TM 值。

应用和意义

DNA 分子 TM 值在分子生物学研究中具有广泛的应用，包括： DNA 印迹：通过比较正常和甲基化 DNA 的 TM 值来检测基因表达的变化。 PCR：优化 PCR 反应条件，确保引物退火在正确的温度下进行。 DNA 变异检测：利用杂合 DNA 的较低 TM 值来检测单核苷酸多态性 (SNP)。 DNA 分子 TM 值受多种因素影响，包括核苷酸组成、离子强度、DNA 浓度等。了解这些因素对 TM 值的影响对于优化分子生物学实验并阐明 DNA 结构和功能至关重要。